Принципът на създаване на генетично модифицирани ваксини е: Генно модифицирани ваксини
Ваксинацията може да се характеризира по различни начини: геноцид, изтребване на население, мащабен експеримент върху живи деца, манипулация на масовото съзнание. Във всеки случай един здрав поглед през огледалото показва, че здравето и ваксините са несъвместими неща.
RGIV – нови продукти в профилактиката на инфекциозни заболявания. Пример за такава ваксина е ваксината срещу хепатит B. Въоръжени с методи на генно инженерство, медицинските биолози имат пряк достъп до генома. Вече е възможно да вмъквате гени, да ги изтривате или да ги дублирате.
Например, ген от един организъм може да бъде вмъкнат в генома на друг. Подобен трансфер генетична информациявъзможно дори чрез „еволюционното разстояние, разделящо човека и бактериите“. Молекулата на ДНК може да бъде нарязана на отделни фрагменти с помощта на специфични ензими и тези фрагменти могат да бъдат въведени в други клетки.
Стана възможно включването бактериални клеткигени на други организми, включително гени, отговорни за синтеза на протеини. По този начин, в съвременни условияполучават значително количество интерферон, инсулин и други биологични продукти. По подобен начин е получена и ваксина срещу хепатит В – генът на вируса на хепатита е вграден в клетката на дрождите.
Както всичко ново, особено генетично създадено лекарство, предназначено за парентерално приложение (отново в големи количества и три часа след раждането на дете!), Тази ваксина изисква дългосрочни наблюдения - т.е. ние говорим заза същите „мащабни процеси... върху деца“.
От множество публикации следва: „Наблюденията стават по-точни и ценни, ако се извършват по време на масови имунизационни кампании. В такива кампании, голям бройдеца. Появата през този период на група от определени патологични синдроми показва, като правило, техните причинно-следствена връзкас ваксинация“. Концепцията за определен патологичен синдром може да включва краткотрайна треска и кашлица, както и пълна или частична парализа или умствена изостаналост.
Освен ваксината Engerix срещу хепатит В, активно налаганата у нас южнокорейска противохепатитна ваксина е обявена за „също толкова безопасна и ефективна“. Генно модифицирани ваксини– „превантивно“ средство с много неизвестни. Нашата страна не е в състояние да провери безопасността на тези продукти поради липсата на подходящи експериментални съоръжения. Не можем нито да контролираме качествено закупените ваксини, нито да създадем условия за приготвяне на безопасни собствени ваксини. Рекомбинантно изследване лекарства- високотехнологичен експеримент, който изисква огромни разходи. Уви, в това отношение ние сме много далеч от нивото на напредналите лаборатории в света и на практика сме напълно неориентирани към контрола на подобни продукти. В тази връзка в Русия (и Украйна) се регистрира всичко, което не е минало клинични изпитванияпри чужди производителиот тези ваксини, или са правени тестове, но в недостатъчен обем... Оттук и лавинообразният брой ваксини от разни доброжелатели, „опитващи се да помогнат на Русия” и носещи ни не утрешните или днешните технологии, а тези от завчера – „по същество отпадъци от съвременното им производство или онези ваксини, които трябва да бъдат изследвани в „мащабни експерименти върху деца“. По-често това се нарича „мащабни наблюдения“, но задачата е една – експерименти върху нашите деца!
Изглежда безсмислено и неморално да се доказва опасността от живачните соли за кърмачета, когато последствията от тяхното въздействие върху тялото на възрастен са широко известни.
Нека си припомним, че живачните соли са по-опасни от самия живак. Въпреки това, местната ваксина DTP, съдържаща 100 µg/ml мертиолат (органоживачна сол) и 500 µg/ml формалин (най-силният мутаген и алерген), се използва от около 40 години. Алергизиращите свойства на формалдехида включват: ангиоедем, уртикария, ринопатия ( хронична хрема), астматичен бронхит, бронхиална астма, алергичен гастрит, холецистит, колит, еритема и кожни пукнатини и др. Всичко това се отбелязва от педиатрите повече от 40 години, но статистиката е скрита зад железни врати от широката общественост. Хиляди деца страдат от десетилетия, но медицинските служители не ги е грижа.
Няма данни за ефекта на мертиодиат и формалин; НИКОЙ НИКОГА НЕ Е ПРОУЧВАЛ ТОЗИ КОНГЛОМЕРАТ върху млади животни по отношение на незабавни реакции и дългосрочни последствия; Да кажем тийнейджъри. Фирмите ПРЕДУПРЕЖДЯВАТ, поради което не носят никаква отговорност за действията на нашите ваксинатори и контрольори! Така в нашата страна продължават много години „мащабни изпитания“ върху нашите деца с развитието на различни патологични синдроми. Всеки ден все повече и повече невинни бебета (тези, които са избягали от аборт) биват хвърляни в тази адска месомелачка, присъединявайки се към редиците на децата с увреждания и техните нещастни родители, без да знаят за своите истинската причинастраданието на техните деца. Внимателно подготвената и проведена „кампания за сплашване на населението” с епидемии от дифтерия, туберкулоза и грип от една страна и забранителните мерки срещу детските градини и училищата не оставят шанс на родителите.
НЕ МОЖЕМ ДА ПОЗВОЛИМ САМО ФИРМИ И НИСКО КОМПЕТЕНТНИ ВАКСИНАТОРИ КОРПОРАТИВНО ДА РЕШАВАТ СЪДБИТЕ НА ДЕЦАТА НИ.
Тъй като не се провежда никъде другаде по света BCG ваксинацияновородени, дейностите, проведени в Русия и Украйна, са експеримент, защото „те оценяват ефективността на комбинираната имунизация на новородени срещу хепатит В и срещу туберкулоза на фона на масова имунизация“. Недопустим стрес за тялото на новородените! Този експеримент „мащабна ваксинация за откриване на патологични синдроми” се провежда в държавен мащаб, който предостави неограничен брой собствени деца за такива наблюдения... без да информира родителите за това! Освен това „патологичните синдроми” могат да се появят година по-късно, или пет години, или много по-късно... Има доказателства, че тази ваксина може да причини цироза на черния дроб след 15-20 години.
Какви компоненти са включени в ENGERIX (ваксина срещу хепатит В)?
1. Основата на лекарството е „модифицирана“ хлебна мая, „широко използвана в производството на хляб и бира“. Думата „генетично модифициран“ тук явно липсва, очевидно поради факта, че тази комбинация вече доста изплаши населението с примера на внесените от чужбина соя, картофи и царевица. Генетично модифицираният продукт съчетава свойствата на съставните си съставки, които при прилагане водят до непредсказуеми последствия. Какво са скрили генните инженери в дрождева клетка освен вируса на хепатит B? Тук можете да добавите гена на вируса на СПИН или гена на всяко раково заболяване.
2. Алуминиев хидроксид. Тук трябва да се подчертае, че в продължение на много десетилетия не се препоръчва (!) използването на този адювант за ваксиниране на деца.
3. Тиомеросалът е мертиолат (органоживачна сол), o вредно влияниекоито към централната нервна системае известен отдавна и принадлежи към категорията на пестицидите.
4. Полисорбент (не е дешифриран).
Генното инженерство е експериментална наука, която изучава моделите на in vitro конструкция и поведение на функционално активни рекомбинантни ДНК молекули в реципиентната клетка.
Обект на изследване на генното инженерство са гените - ДНК сегменти, кодиращи синтеза на определени протеини.
Принципът на създаване на генетични инженерни ваксинисе крие във факта, че генът, който ни интересува (отговорен за синтеза на имунния протеин на вируса), се „изрязва“ от ДНК на вируса с помощта на ензими (рестриктази) и се вмъква с помощта на ензими (лигази), в ДНК на вектора (например в плазмида на Е. coli - тази автономна кръгова ДНК от 4-6 хиляди нуклеотидни двойки, способна да се размножава в клетки на Е. соя). След това тази рекомбинантна ДНК се въвежда в клетките на Е. coli, в които рекомбинантната ДНК се умножава (репликира) и възниква експресията на интегрирания ген, т.е. синтезът на съответния протеин (кодиран от интегрирания ген на вируса).
Бактериалните клетки на E. coli се култивират в хранителна среда, и настъпва „производството” на имуногенния протеин на вируса, който се изолира и след подходящо пречистване се използва като материал за ваксината. Все пак трябва да се отбележи, че много вирусни протеини, успешно синтезирани в микроорганизми, имат много ниска имуногенна активност. Причината за това са особеностите на формирането на структурата на вирусните протеини. По правило те са гликозилирани и имат сложна третична или кватернерна структура. Така хемаглутининът на грипния вирус се намира във вириона под формата на тример, който се образува от мономерни полипептиди в животински клетки. Не е възможно да се получи такава функционално активна структура на хемаглутинин in vitro. Имуногенността на хемаглутинина във вириона е няколко хиляди пъти по-висока от тази на мономерния полипептид, синтезиран в бактерии.
При производството на генетично модифицирани ваксини, в допълнение към плазмидите, като вектори се използват фаги, дрожди и животински вируси (вирус на ваксиния, аденовируси, бакуловируси и херпесвируси).
Най-голям ефект се получава с ваксиния вирус, използван като вектор. Този вирус има голям геном (около 187 хиляди базови двойки). Възможно е да се премахне значителна част от него (около 30 хиляди базови двойки), която не е жизненоважна за възпроизводството на този вирус в клетките, и на негово място да се вмъкнат чужди гени на вирусите, срещу които се произвежда ваксината. Получената рекомбинантна ДНК е способна да се размножава в тялото на ваксинирания и да предизвиква образуването на имунитет не само срещу едра шарка, но и срещу вируса, чийто ген е вграден в генома му. Използването на вируса ваксиния като вектор за ваксинация има редица предимства: способността да се размножава в животински клетки на много видове; експресират множество гени; индуциране на хуморален и клетъчен имунитет; термична стабилност; икономично производство и лекота на използване. Установените по-рано недостатъци във вируса на ваксиния, свързани с реактогенността, бяха до голяма степен елиминирани чрез генетична манипулация. Възможността за включване на няколко гена, кодиращи съответните имуногени, дава възможност за ваксиниране на животни едновременно срещу няколко вирусни заболявания. Все пак трябва да се има предвид, че за индивиди, които вече са имунизирани срещу ваксиния вируса, ваксинацията с рекомбинантни вируси не дава ефект поради липсата на оцеляване.
IN последните годинипрофилактични препарати са получени от рекомбинантен щам на ваксиниа вирус, съдържащ гени, кодиращи повърхностни гликопротеини на грипни вируси, бяс, респираторен сицитиал, болест на Ауески, голям инфекциозен ринотрахеит говедаи т.н.
Ако намерите грешка, моля, маркирайте част от текста и щракнете Ctrl+Enter.
През 70-те години нашия век, успехите на генетичните клетъчно инженерстводаде възможност за развитие нова технологияполучаване на антивирусни ваксини, наречени ваксини с генно инженерство. Необходимостта от подобни разработки беше продиктувана от следните причини: 1) липса на естествени източницисуровини/подходящи животни; 2) невъзможността за размножаване на вируса в класически обекти/тъканни култури и т.н. Принципът на създаване на генно инженерни ваксини включва: а) изолиране на естествени антигенни гени или техни активни фрагменти; б) интегриране на тези гени в прости биологични обекти - бактерии, дрожди; в) получаване необходим продуктв процеса на култивиране на биологичен обект - продуцент на антиген. Вирусните геноми са пренебрежимо малки по размер в сравнение с генома на клетка (прокариотна или еукариотна). Гените, кодиращи защитни протеини, могат да бъдат клонирани директно от вируси, съдържащи ДНК, или от вируси, съдържащи РНК, след обратна транскрипция на техния геном (за вируси с непрекъснат геном) или дори отделни гени (за вируси с фрагментиран геном). На първия етап от развитието на новата биотехнология учените се занимават предимно с клониране на вирусни гени, кодиращи синтеза на протеини, носещи основните антигенни детерминанти. Скоро бяха получени рекомбинантни бактериални плазмиди, носещи гените или геномите на вирусите на хепатит B, грип и полимиолит. Следващата стъпка беше получаването на антигена. Въпросът се оказа труден, тъй като експресията на вирусни гени в прокариотната система беше незначителна. Това може да се обясни с факта, че вирусите в хода на еволюцията са се приспособили да паразитират в човешкото тяло. С течение на времето обаче бяха получени антигенни експресии. И един от най-типичните примери, показващи необходимостта от създаване на ваксини с генно инженерство, е хепатит В. Проблемът е, че все още не са открити клетъчни или животински култури, чувствителни към вируса. Следователно разработването на метод за генно инженерство за производство на ваксини се превърна в необходимост. Методът се състои в това, че геномът се клонира в клетки на Е. coli с помощта на плазмидни и фагови вектори. Бактериите, носещи рекомбинантни плазмиди, произвеждат протеини, които реагират специфично с антитела срещу самия вирус. През 1982 г. в САЩ е произведена първата експериментална ваксина срещу хепатит В. Еукариотни клетки (дрожди, животни) се използват и за производството на вирус-специфични протеини (антигени). Работи се интензивно за създаване на други генетично модифицирани ваксини, по-специално срещу грип, херпес, шап, енцефалит, пренасян от кърлежии други вирусни инфекции. Най-новият подход за създаване на вирусни ваксини е включването на гени, отговорни за синтеза на вирусни протеини, в генома на друг вирус. По този начин се създават рекомбинантни вируси, които осигуряват комбиниран имунитет.
No43 Генно инженерни ваксини. Принципи на получаване, приложение.
Генно модифицираните ваксини са лекарства, получени чрез биотехнология, която по същество се свежда до генетична рекомбинация.
Първо се получава ген, който трябва да се интегрира в генома на реципиента. Малките гени могат да бъдат получени чрез химичен синтез. За да направите това, броят и последователността на аминокиселините в протеиновата молекула на веществото се дешифрират, след което от тези данни се определя редът на нуклеотидите в гена, последван от химичен синтез на гена.
Големи структури, които са доста трудни за синтезиране, се получават чрез изолиране (клониране), целенасочено елиминиране на тези генетични образувания с помощта на рестрикционни ензими.
Целевият ген, получен по един от методите, се слива с ензими към друг ген, който се използва като вектор за вмъкване на хибридния ген в клетката. Като вектори могат да служат плазмиди, бактериофаги, човешки и животински вируси. Експресираният ген се вмъква в бактериална или животинска клетка, който започва да синтезира необичайно преди това вещество, кодирано от експресирания ген.
Е. coli, B. subtilis, псевдомонади, дрожди, вируси най-често се използват като реципиенти на експресирания ген; някои щамове могат да преминат към синтез чуждо веществодо 50% от неговите синтетични възможности - тези щамове се наричат суперпродуценти.
Понякога към генно модифицираните ваксини се добавя адювант.
Примери за такива ваксини са ваксината срещу хепатит B (Engerix), сифилис, холера, бруцелоза, грип и бяс.
Има определени трудности при разработването и прилагането:
- дълго времегенетично модифицираните лекарства бяха третирани с повишено внимание.
- значителни средства се изразходват за разработване на технология за получаване на ваксина
- при получаване на лекарства по този метод възниква въпросът за идентичността на получения материал с естествено вещество.
Асоциирани и комбинирани ваксини. Предимства. Ваксинотерапия.
Асоциираните ваксини са препарати, които включват няколко различни антигена и позволяват имунизация срещу няколко инфекции едновременно. Ако лекарството съдържа хомогенни антигени, тогава такава свързана ваксина се нарича поливаксина. Ако свързаното лекарство се състои от различни антигени, тогава е препоръчително да се нарече комбинирана ваксина.
Възможна е и комбинирана имунизация, когато няколко ваксини се прилагат едновременно в различни части на тялото, например срещу едра шарка (кожно) и чума (подкожно).
Пример за поливаксина е жива полиомиелитна ваксина, съдържаща атенюирани щамове на полиомиелит тип I, II, III. Пример за комбинирана ваксина е DTP, която включва инактивирана корпускулярна коклюшна ваксина, дифтериен и тетаничен токсоид.
Комбинираните ваксини се използват при тежки противоепидемични ситуации. Тяхното действие се основава на способността имунна системаотговарят на няколко антигена едновременно.
Молекулярни ваксини.
AG присъства в молекулярна форма или под формата на фрагменти от неговите молекули, които определят специфичността на антигенността, т.е. под формата на епитопи, детерминанти.
Получават се антигени в молекулярна форма:
а) в процеса на биосинтеза по време на култивирането на естествени и рекомбинантни щамове на бактерии и вируси и
б) химичен синтез (по-трудоемък и има ограничени възможностив сравнение с биосинтезата.
Типичен пример за молекулни антигени, произведени чрез биосинтеза от естествени щамове е са токсоиди(тетанус, дифтерия, ботулин и др.), получени от неутрализирани токсини. В медицинската практика се използва молекулярна ваксина срещу Vir. Хепатит B, получен от Ag на вируса, произведен от рекомбинантен щам на дрожди.
Генно модифицирани ваксини. Генно модифицираните ваксини съдържат патогенни Ags, получени чрез методи на генно инженерство, и включват само силно имуногенни компоненти, които допринасят за формирането на защитен имунитет
Възможни са няколко варианта за създаване на генетично модифицирани ваксини.
Въвеждане на вирулентни гени в авирулентни или слабо вирулентни микроорганизми.
Въвеждане на вирулентни гени в несвързани микроорганизми с последващо изолиране на Ag и използването му като имуноген.
Изкуствено отстраняване на вирулентни гени и използване на модифицирани организми под формата на корпускулярни ваксини.
Векторни (рекомбинантни) ваксини
Ваксини, получени с помощта на методи на генно инженерство. Същността на метода: гените на вирулентен микроорганизъм, отговорен за синтеза на защитни антигени, се вмъкват в генома на безвреден микроорганизъм (e. Coli), който при култивиране произвежда и натрупва съответния антиген.
Рекомбинантни ваксини – за производството на тези ваксини се използва рекомбинантна технология, интегрираща генетичния материал на микроорганизъм в дрождеви клетки, които произвеждат антигена. След култивирането на дрождите от тях се изолира желаният антиген, пречиства се и се приготвя ваксина. Пример за такива ваксини е ваксината срещу хепатит B (Euvax B).
Ваксините се използват главно за активна специфична профилактика, понякога за лечение на заболявания.
Момче Коля И., 7 г., стана капризен, отказва да яде, има неспокоен сън, температура 38,5. На 2-рия ден след заболяването педиатърът при преглед на детето откри разширено дясно паротидна жлеза. Кожата над отока е напрегната, но не е възпалена. Лекарят диагностицира заушка. Избройте звената в епидемичната верига: източник, възможни начинитрансфери. Какви лабораторни диагностични методи трябва да се използват за потвърждаване на диагнозата? Какви лекарства трябва да се използват за профилактика?